Blend Taq 價格 PCR酶 貨號:BTQ-101 北京 生物試劑
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Blend Taq 價格 PCR酶 貨號:BTQ-101 北京 生物試劑
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Blend Taq 價格 PCR酶 貨號:BTQ-101 生物試劑
北京綠源博德生物科技有限公司是一家高科技生物技術(shù)企業(yè),長期供應(yīng)常規(guī)生化試劑,血清,培養(yǎng)基,大量現(xiàn)貨。 公司在保證質(zhì)量同時,以價格優(yōu)、到貨快、服務(wù)周到、誠信交易為宗旨與理念,致力于各種生物試劑、抗體、血清、Elisa試劑盒、細(xì)胞因子的銷售推廣及服務(wù)工作。歡迎來電咨詢及訂購!
型號規(guī)格 Model | DTC-4 (96 +) |
樣品臺容量 Block Capacity | 0.2ml x 96+ 0.5ml x 77、12×8聯(lián)排管、96微孔板、 原位板 (選購件) |
溫控范圍 Temperature Control Range | 0-99℃ |
升溫速度 Heating rate | 3℃/Sec |
降溫速度 Cooling rate | 2℃/ Sec |
*控溫精度度和均勻度 Temperature Accuracy | ±0.1℃ |
熱蓋溫度 Hot Cover Temperature | 105℃ |
可記憶程序數(shù)目 No. of Programs | 99個 |
溫 階 Temperature step | 1-30個 |
保溫時間 Set Time | 1 sec.-99minutes 59sec. |
單文件內(nèi)可設(shè)置多個循環(huán) More than one repetitions | 多文件連接 More than one documents connect. |
產(chǎn)品外形尺寸 Size (W*D*H) | 27cm x 23cm x 24cm |
產(chǎn)品重量 Weight | 6kg |
使用環(huán)境 Operating Environment | 溫度5-40℃,相對濕度≤80% Temp. 5-40℃, Relative Humidity ≤80% |
* 寬電壓工作范圍 Power Supply | AC170-270V, |
* 保修年限 Warranty period | 2年 2Year |
選配 choice | HBV、HCV、HIV、TB、HPV、CT、NG、UU、YMDD等熒光和各種電泳PCR試劑 |
北京RT-PCR實驗代做支持技術(shù)售后服務(wù)-北京冬歌生物
RT-PCR實驗有三步:抽提RNA,RT,PCR。
PCR:
1、參照基因 PCR
參照基因一般選擇看家基因(長表達(dá)、高表達(dá)量 的基因),常用18S、β-actin、bubulin、GAPDH,其中ACTIN最為普遍;
參照基因與目的基因在同一個管子內(nèi)進(jìn)行PCR反應(yīng)的情況下,稱之為內(nèi)參;
參照基因與目的基因在不同管子內(nèi)反應(yīng)成為外參;
由于內(nèi)參可能與目的基因競爭模板及酶,或造成其它干擾,外參的應(yīng)用較為普遍。
2、目的基因PCR
典型的引物18到24個核苷長,引物需要足夠長,保證序列獨特性,并降低序列存在于非目的序列位點的可能性。
RT-PCR實例:
1、實驗材料:擬南芥野生型Ws及突變體m1、m2花序
2、實驗?zāi)康模悍治鰉1、m2與野生型花序中G1基因的表達(dá)的差異
3、實驗步驟:設(shè)計ACTIN及G1基因的引物;分別抽取野生型Ws及突變體m1、m2花序RNA,DNase I處理,以盡量去除基因組DNA;電泳檢測,估計RNA總量;取1ug左右的RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄;
取反轉(zhuǎn)錄好的cDNA總量的1/10(10ul反轉(zhuǎn)錄體積則取1ul),稀釋10倍(稀釋至10ul),取1/10(1ul)為模板,用ACTIN引物、普通PCR體系、20-25個循環(huán)、以基因組DNA為對照(因為引物跨內(nèi)含子,所以基因組DNA擴(kuò)增出的條帶大小與cDNA擴(kuò)增出的條帶大小不同,以去除殘留的基因組DNA的影響)做PCR;
取等量產(chǎn)物電泳,根據(jù)電泳條帶的亮度調(diào)整模板量(如m1的亮度為Ws的2倍,則下次PCR時m1的模板為0.5ul),直到電泳亮度基本一致,可認(rèn)為此時所取的不同體積的野生型Ws及突變體m1、m2模板里RNA的含量基本相同。
以G1基因引物,按調(diào)好的模板體積做PCR,電泳。
根據(jù)電泳條帶的亮度比較野生型Ws及突變體m1、m2中G1基因的表達(dá)差異。
如有需要歡迎來電咨詢 QQ: 電話: 400--1113
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產(chǎn)品特性> 彩色觸屏界面> 2D- 梯度功能,同時優(yōu)化退火和變性條件> 超快的升降溫速率> 卓越的溫度均一性(±0.2℃ @20-72℃)> 卓越的溫控精度(±0.15℃)> Flexlid 熱蓋支持所有類型的耗材> 最多 50 臺機(jī)器聯(lián)網(wǎng)> 內(nèi)置儀器自檢功能,無需加密狗> 配套多通道溫度校準(zhǔn)系統(tǒng)> 極低噪音(少于 40 分貝)> 2 年保修...............................................................................................................................................................................................
人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(SEPCR)酶聯(lián)免疫檢測
試劑盒使用說明書
使用前仔細(xì)閱讀本說明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于生物素雙抗體夾心技術(shù)原理,來檢測人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(SEPCR)),只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。
用 途: 用于人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(SEPCR)的測定。
工作原理
本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定樣品中人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(SEPCR)的水平。向預(yù)先包被了人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(SEPCR)單克隆抗體的酶標(biāo)孔中加入可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(SEPCR),溫育;溫育后,加入生物素標(biāo)記的抗SEPCR抗體,再與鏈霉親和素-HRP結(jié)合,形成免疫復(fù)合物,再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶,然后加入底物A、B,產(chǎn)生藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺與樣品中人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(SEPCR)的濃度呈正相關(guān)。
試劑盒組成
1 | 標(biāo)準(zhǔn)品(128ng/ml) | 0.5ml | 7 | 顯色劑A液 | 6ml |
2 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 3ml | 8 | 顯色劑B液 | 6ml |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12孔×8條 | 9 | 終止液 | 6ml |
4 | 鏈霉親和素-HRP | 6ml | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 生物素標(biāo)記的抗- SEPCR抗體 | 1ml | 12 | 密封袋 | 1個 |
需要而未提供的試劑和器材
1. 37℃恒溫箱。
2. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
3. 精密移液器及一次性吸頭
4. 蒸餾水,
5. 一次性試管
6. 吸水紙
注意事項
1. 從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其性,以避免試驗誤差。
3. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
4. 為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。
5. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
6. 底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
洗板方法
手工洗板方法:甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
標(biāo)本要求
1.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
操作程序
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:(本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶請按照說明自行在小試管中倍比稀釋):
64ng/ml | (5號標(biāo)準(zhǔn)品) | 120μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
32ng/ml | (4號標(biāo)準(zhǔn)品) | 120μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
16ng/ml | (3號標(biāo)準(zhǔn)品) | 120μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
8ng/ml | (2號標(biāo)準(zhǔn)品) | 120μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
4ng/ml | (1號標(biāo)準(zhǔn)品) | 120μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入120μl的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3. 加樣:1)空白孔:空白對照孔不加樣品,生物素標(biāo)記的抗SEPCR抗體,鏈霉親和素-HRP,只加顯色劑A&B和終止液,其余各步操作相同;2)標(biāo)準(zhǔn)品孔:加入標(biāo)準(zhǔn)品50μl,鏈霉素-HRP50μl(標(biāo)準(zhǔn)品中已事先整合好生物素抗體,故不加);3)待測樣品孔:加入樣本40μl,然后各加入抗- SEPCR抗體10μl、鏈酶親和素-HRP50μl,蓋上封板膜,輕輕振蕩混勻,37℃溫育60分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘。
7. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
8. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后10分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。
操作程序總結(jié):
準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,生物素標(biāo)記二抗和酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)60分鐘
洗板5次,加入顯色液A、B,37℃顯色10分鐘
加入終止液
10分鐘之內(nèi)讀OD值
計算
檢測范圍:0.5ng/ml→100ng/ml。
規(guī)格: 96T/盒
保存: 2-8℃
期: 6個月(2-8℃)。
人活化蛋白C抵抗素(APCR)elisa測定試劑盒上海杏宜生物科技有限公司供應(yīng)的elisa試劑盒(酶聯(lián)免疫試劑盒)等試劑產(chǎn)品經(jīng)專業(yè)權(quán)威機(jī)構(gòu)認(rèn)證,本試劑盒以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本,并得到權(quán)威的確證方法和確證的樣品進(jìn)行檢測。公司專業(yè)提供各種種屬,供應(yīng)的ELISA試劑盒統(tǒng)一價銷售。
用途:用于測定血清、血漿、組織和相關(guān)液體樣本中的含量或者活性
特異性:人活化蛋白C抵抗素(APCR)elisa測定試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)
規(guī)格:96T/48T
存儲條件: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(較長時間不用時)
適用范圍:僅用于科研實驗,禁用于臨床
有效期:6個月
人活化蛋白C抵抗素(APCR)elisa測定試劑盒等elisa試劑盒產(chǎn)品——上海杏宜生物科技有限公司是一家專業(yè)經(jīng)營生物、儀器、試劑、耗材的公司,在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過不懈的努力,已成為國內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一,代理許多國際先進(jìn)水平的高科技產(chǎn)品,包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診斷等多個研究及應(yīng)用領(lǐng)域。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國,在同行獲得一致好評。 特別是生物試劑和細(xì)胞產(chǎn)品更是種類齊全、價格實惠,原裝進(jìn)口原代細(xì)胞,專業(yè)培養(yǎng)基,常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基,細(xì)胞培養(yǎng)用的相關(guān)試劑,氨基酸,抗生素,維他命類產(chǎn)品品種齊全,試劑耗材種類繁多。
主要經(jīng)營ELISA試劑盒、細(xì)胞、血清、抗體、金標(biāo)試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗、毒素、移液器等產(chǎn)品,產(chǎn)品暢銷國內(nèi)大部分地區(qū),銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海杏宜生物擁有雄厚的實力、合理的價格和優(yōu)良的服務(wù),能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求,與國內(nèi)多家企業(yè)建立了良好的長期合作關(guān)系,在市場上樹立了公司的良好信譽和形象。
上海杏宜生物人活化蛋白C抵抗素(APCR)elisa測定試劑盒的優(yōu)點:
?。?/span>1)、高效、靈敏、特異的抗體;
?。?/span>2)、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
?。?/span>3)、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
?。?/span>4)、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
SHXY71339Guinea pig Leptospira IgG ELISA Kit豚鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira)elisa試劑盒Guinea pig Leptospira IgG ELISA Kit96T/48TSHXY71340HGF ELISA Kit豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒g(shù)uinea pig hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit96T/48TSHXY71341GAPDH ELISA kit豚鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)ELISA試劑盒Guinea pig Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH ELISA kit96T/48TSHXY71342SCF/MGF ELISA kit豚鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒Guinea Pig Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA kit96T/48TSHXY71343CAM ELISA Kit豚鼠鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒Guinea Pig calmodulin,CAM ELISA Kit96T/48TSHXY71345CCK ELISA Kit豚鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒Guinea pigCholecystokinin,CCK ELISA Kit96T/48TSHXY71346CHE ELISA Kit豚鼠膽堿脂酶(CHE)ELISA試劑盒Guinea pig cholinesterase,CHE ELISA Kit96T/48TSHXY71347MCP-4 ELISA kit豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒Guinea Pig monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA kit96T/48TSHXY71348MCP1 ELISA Kit豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒Guinea pig monocyte chemotactic protein 1,MCP1 ELISA Kit96T/48TSHXY71349MAO ELISA Kit豚鼠單胺氧化酶(MAO)ELISA試劑盒Guinea pig monoamine oxidase,MAO ELISA Kit96T/48TSHXY71350OT ELISA Kit豚鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒Guinea Pig Oxytocin,OT ELISA Kit96T/48TSHXY71351ACTH ELISA kit豚鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒Guinea Pig adrenocorticotropic hormone,ACTH ELISA kit96T/48TSHXY71352FSH ELISA Kit豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒g(shù)uinea pig follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit96T/48TSHXY71353Guinea pig estrogen Elisa kit豚鼠雌激素(estrogen)ELISA試劑盒Guinea pig estrogen Elisa kit96T/48TSHXY71354iFABP ELISA Kit豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒g(shù)uinea pig intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit96T/48TSHXY71355EGF ELISA Kit豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒Guinea pig Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit96T/48TSHXY71356LT-D4 ELISA Kit豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒Guinea pig leukotriene D4,LT-D4 ELISA Kit96T/48TSHXY71357LT-B4 ELISA Kit豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒g(shù)uinea pig Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit96T/48TSHXY71358IL-8 ELISA Kit豚鼠白介素8(IL-8)ELISA試劑盒Guinea pig Interleukin 8,IL-8 ELISA Kit96T/48TSHXY71359IL-6 ELISA Kit豚鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒g(shù)uinea pig Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit96T/48TSHXY71360IL-5 ELISA Kit豚鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒Guinea pig interleukin 5,IL-5 ELISA Kit96T/48TSHXY71361IL-4 ELISA Kit豚鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒Guinea pig interleukin 4,IL-4 ELISA Kit96T/48TSHXY71362IL-22 ELISA Kit豚鼠白介素22(IL-22)ELISA試劑盒Guinea pig Interleukin 22,IL-22 ELISA Kit96T/48TSHXY71364IL-1ra ELISA kit豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒Guinea Pig Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA kit96T/48TSHXY71365IL1B ELISA kit豚鼠白介素1β(IL1B)ELISA試劑盒Guinea pig Interleukin-1 beta,IL1B ELISA kit96T/48TSHXY71366IL-18 ELISA Kit豚鼠白介素18(IL-18)ELISA試劑盒Guinea pig Interleukin 18,IL-18 ELISA Kit96T/48TSHXY71367IL-17 ELISA Kit豚鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒Guinea pig Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit96T/48TSHXY71368IL-13 ELISA Kit豚鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒Guinea pig interleukin 13,IL-13 ELISA Kit96T/48TSHXY71369IL-12/P70 ELISA KIT豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒Guinea pig Interleukin-12,IL-12/P70 ELISA KIT96T/48TSHXY71370IL-10 ELISA Kit豚鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒Guinea pig interleukin 10,IL-10 ELISA Kit96T/48T人活化蛋白C抵抗素(APCR)elisa測定試劑盒上海杏宜生物擁有專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊,凡購買我司elisa試劑盒等相關(guān)生物試劑產(chǎn)品,公司提供免費代測,凡樣本數(shù)量較多的單位,我司將派專業(yè)人員前往取相關(guān)樣。Elisa試劑盒相關(guān)說明書等資料,詳情請來電咨詢!
通用名稱:禽流感病毒H7N9(2013)核酸測定試劑盒(熒光PCR法)英文名稱:Avian influenza virus (H7N9) Real Time RT-PCR Kit 【包裝規(guī)格】 25人份/盒【預(yù)期用途】通過對樣本中禽流感病毒H7基因和N9基因的特異性RNA核酸片段分別進(jìn)行定性檢測,可用于臨床對可疑感染患者的病原學(xué)鑒別診斷。【檢驗原理】本試劑盒采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)結(jié)合熒光探針技術(shù),對禽流感H7N9特異性核酸片段進(jìn)行熒光PCR檢測?!驹噭┖兄饕M成成份】序號 組分 數(shù)量 體積/人份 1 H7N9核酸熒光PCR檢測混合液 480μl×1 19μl×1 2 RT-PCR酶 28μl×1 1μl×1 3 DEPC-H2O 400ul×1 4 陽性對照品 30ul×1 說明:不同批號的組分不可以互換使用。自備試劑:Trizol;氯仿;75%乙醇;異丙醇或磁珠法RNA提取試劑;本公司可以代為訂購或提供銷售商聯(lián)系方式。【儲存條件和有效期】 試劑盒應(yīng)在-20℃及以下溫度避光保存,有效期12個月。采用冰盒行運輸;熒光PCR檢測混合液反復(fù)凍融不宜超過3次?!具m用儀器】 本試劑盒適用于ABI7000,ABI7300,ABI7500,ABI7900,MJ-chromo4,MX3000P,MX3005P,SmartCyclerⅡ,Rotor-Gene6000,Lightcycler R480,iCycleriQ4,iCycleriQ5,Bio-Rad CFX96,SLAN等多色熒光PCR儀及相應(yīng)軟件?!緲?biāo)本要求】人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測?!緳z驗方法】 1.標(biāo)本、對照品的核酸裂解處理用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本,具體操作參見該試劑盒說明書?;蛴肨rizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300μl裂解液(Trizol),再加入100μl氯仿, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700μl 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20μl DEPC-H2O溶解RNA。 2.試劑配制取n×19μl H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1μl RT-PCR酶(n為反應(yīng)管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。 3.加樣 取上述混合液20μl置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5μl分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。